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50T空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(熒光-PCR法)





產(chǎn)品簡介
空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(熒光-PCR法)是我司實(shí)時(shí)熒光探針法試劑盒,種類齊全,精準(zhǔn)高效,現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎廣大新老客戶前來選購。
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【產(chǎn)品名稱】
商品名稱:空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(熒光-PCR法)
【包裝規(guī)格】25T/盒、50T/盒
【檢驗(yàn)原理】本試劑盒采用TaqMan 探針法實(shí)時(shí)熒光PCR 技術(shù),根據(jù)空腸彎曲菌(CJ)基因設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,用熒光PCR技術(shù)對(duì)空腸彎曲菌(CJ)的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染病料的病原學(xué)診斷。
我司的實(shí)時(shí)熒光探針法試劑盒種類齊全(涵蓋禽病、豬病、馬牛羊病和水產(chǎn)動(dòng)物病原體檢測(cè)),精準(zhǔn)高效,多重檢測(cè)(一重、雙重、三重),現(xiàn)貨供應(yīng)歡迎廣大新老客戶前來咨詢和選購。
【試劑組成】
包裝規(guī)格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
反應(yīng)液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
陽性質(zhì)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
陰性質(zhì)控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
說明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。
【適用儀器】 ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量PCR 檢測(cè)儀。
【空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(熒光-PCR法)使用方法】
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
核酸提取 推薦采用核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提取,請(qǐng)按照試劑說明書進(jìn)行操作。
2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照;反應(yīng)管數(shù)每滿10 份,多配制1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 | 反應(yīng)液 | 酶液 |
用量(樣本數(shù)為 N) | 19μL | 1μL |
將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,20μL/管。
3.加樣(樣本處理區(qū))將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取5μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
4.PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
2.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
2.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;熒光通道選擇:檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光,選擇 None 即可。
2.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 | 循環(huán)數(shù) | 溫度 | 時(shí)間 | 收集熒光信號(hào) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 2min | 否 |
2 | 45cycles | 95℃ | 15sec | 否 |
60℃ | 30sec | 是 |
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請(qǐng)參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置,以分析 ABI7500 儀器為例) 反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根 據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整,Start 值可設(shè)在 3~15、End 值可設(shè)在 5~20,使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期,陰性質(zhì)控 品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線),點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果。
5.2結(jié)果判斷
陽性:檢測(cè)通道Ct 值≤40,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;
陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果無Ct 值,且無特異性擴(kuò)增曲線;
可疑:樣本檢測(cè)結(jié)果40<Ct 值≤45,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為40值≤45,且曲線有明顯的增長 曲線,判定為陽性,否則為陰性。
5.3 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) 陰性質(zhì)控品:無特異性擴(kuò)增曲線或無Ct 值顯示;陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長期,且 Ct 值≤32;以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
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